2. Подготовка пациента для проведения СА/ВЭЖХ
сыворотки крови.
1. Обследование проводится строго натощак,
за 2 дня исключается алкоголь (в т.ч. капли на спирту), за сутки до обследования
исключить прием лекарственных средств (за исключением жизненно необходимых).
2. Не рекомендуется проводить обследование беременным,
кормящим грудью, женщинам во время менструации, оптимальные сроки обследования: 3-5 день после
окончания менструации.
3. Лица, получающие курс лекарственных
средств или биологически активных добавок, могут пройти обследование не раньше
2 месяцев после окончания курса. Исключение составляют препараты, принимаемые по
жизненным показаниям (инсулин и др.).
4. Лица, прошедшие курс лучевой или
химиотерапии, подвергшиеся радиоизотопному обследованию, могут пройти
обследование не ранее, чем через 3 месяца после этого.
3.
Подготовка материала для проведения СА/ВЭЖХ сыворотки крови.
Утром (строго натощак) кровь из вены
забирают в количестве 10 мл. Внимание!
Пациент должен быть подготовлен согласно требованиям
п.2.
Полученную кровь подвергают центрифугированию при 400G в
течение 10 минут. Отделенную сыворотку выливают в чистую герметично
закрытую тару. В жидком виде сыворотка пригодна для исследования в течение 3
суток (хранить при +40С). Для увеличения срока хранения сыворотки
(только для СА-анализа!) и/или ее транспортировки можно высушить образец: сыворотка выливается в
чашку Петри (стеклянную или пластиковую, диаметром 4 см или более), избегая
попадания эритроцитов, и
высушивается при комнатной температуре в темном месте в течение 2 суток.
Высушенная сыворотка пригодна для анализа в течение 1 месяца [как минимум]
(хранить при комнатной температуре в темном месте).
Внимание:
сыворотка с признаками гемолиза и/или примесью эритроцитов непригодна для
анализа!
4.
Проведение СА/ВЭЖХ.
Полученные
образцы
сыворотки подвергают дальнейшей обработке и выполняют спектрометрию на
инфракрасном Фурье-спектрометре и/или ВЭЖХ. ИК-спектры и/или хроматограммы подвергают математическому анализу по
авторским алгоритмам.
5. Диагностическая ценность
методов СА/ВЭЖХ.
Для всех приведенных ниже диагностических
позиций
диагностические показатели колеблются в пределах: диагностическая точность
86-93%,
чувствительность 81-93%,
специфичность 95-100%. Заключение
по перечисленным ниже позициям дается в форме «наличие-отсутствие» или
иным, указанным в позиции способом. Метод позволяет выявить заболевания
практически в любой, в том числе и самой ранней, стадии развития, когда
патологические изменения еще не улавливаются большинством методов
инструментальной диагностики.
Рекомендуется использовать метод для первичной/скрининговой диагностики
злокачественных новообразований (ЗНО) и доброкачественных заболеваний и для дифференциальной диагностики
доброкачественных и
злокачественных патологических процессов.
5.1. Туберкулез легких (только для мужчин):
наличие - отсутствие.
5.2. Доброкачественная патология женской половой
сферы {без различения}: наличие - отсутствие.
5.3. Доброкачественная патология молочной железы
{без различения}: наличие - отсутствие.
5.4. Доброкачественная патология лимфоидной ткани
{без различения}: наличие - отсутствие.
5.5. Доброкачественная патология желудка {без
различения}: наличие - отсутствие.
5.6. Доброкачественная патология толстого
кишечника{без различения}: наличие - отсутствие.
5.7. Доброкачественная патология простаты {без
различения}: наличие - отсутствие.
5.8. Доброкачественная
патология мочевого пузыря {без различения}: наличие - отсутствие.
5.9. Доброкачественная патология почки {без различения}: наличие -
отсутствие.
5.10.
Злокачественное новообразование легких: наличие - отсутствие.
5.11. Злокачественное новообразование желудка:
наличие - отсутствие.
5.12. Злокачественное новообразование толстого
кишечника: наличие - отсутствие.
5.13. Злокачественное
новообразование женской половой сферы: наличие - отсутствие.
5.14. Злокачественное
новообразование мочевого пузыря: наличие - отсутствие.
5.15. Злокачественное
новообразование молочной железы (наличие - отсутствие), различение по
стадиям: I,II или III,IV.
5.16. Злокачественное
новообразование лимфоидной ткани: наличие - отсутствие.
5.17. Злокачественное
новообразование простаты: наличие - отсутствие.
5.18. Злокачественное
новообразование почки: наличие - отсутствие.
Помимо этого, производится оценка риска возникновения ЗНО перечисленных выше органов и тканей на временной промежуток в 1 год.
6.
Преимущества метода СА перед другими диагностическими процедурами.
В настоящее время для скрининговой
диагностики ЗНО используются, в основном, следующие
методы: рентгенография, УЗИ, анализ крови на биохимические сывороточные онкомаркеры,
цитологическое исследование смывов/мазков с шейки матки, анализ стула на
скрытую кровь.
6.1. Преимущества спектрального анализа
сыворотки крови перед рентгенографией:
1) гораздо более высокие
чувствительность и специфичность;
2) возможность диагностировать
ЗНО
в ранних стадиях;
3) отсутствие
облучения пациента;
4) получение информации сразу о нескольких видах
ЗНО и ряде незлокачественных заболеваний.
6.2. Преимущества спектрального анализа
сыворотки крови перед УЗИ: см. п.6.1, кроме 3).
6.3. Преимущества
спектрального анализа сыворотки крови перед анализом крови на биохимические
сывороточные онкомаркеры.
Приведенные ниже сравнения по ЗНО органов, которые могут быть
обследованы методами СА/ВЭЖХ, составлены на основе оценок и рекомендаций
применения сывороточных биохимических онкомаркеров для скрининга/первичной
диагностики ЗНО от следующих организаций: Национального института рака США (National cancer institute, NCI),
Американского общества клинической онкологии (American
Society of Clinical Oncology,
ASCO)
и Национальной всеобъемлющей раковой сети США (National Comprehensive
Cancer Network,
NCCN).
1). ЗНО легких.
NCI, ASCO и NCCN
не дают никаких рекомендаций по использованию сывороточных онкомаркеров для
диагностики ЗНО легких.
2). ЗНО желудка.
ASCO и NCCN
не дают никаких рекомендаций по использованию сывороточных онкомаркеров для
диагностики ЗНО желудка.
Сайт NCI сообщает, что по данным Kitahara F. с соавт.
[5], использование комбинации таких
критериев, как концентрация сывороточного пепсиногена I менее 70 нг/мл и
отношение концентрации пепсиногена I к концентрации пепсиногена II (также в
сыворотке крови) менее 3, обеспечило чувствительность 84.6% при специфичности
73.5% (13 больных раком желудка из 5113 обследованных).
В данном случае величина чувствительности теста не хуже таковой у
СА/ВЭЖХ, но существенно более низкая специфичность обеспечивает худшую, по
сравнению с СА/ВЭЖХ, диагностическую точность.
3). ЗНО толстого
кишечника.
NCI не дает никаких рекомендаций по использованию сывороточных онкомаркеров для
диагностики ЗНО толстого кишечника.
В последней на текущий момент версии рекомендаций
ASCO (2006г) по
использованию опухолевых маркеров при раках желудочно-кишечного тракта
[6] ни один
из рассмотренных экспертами сывороточных онкомаркеров не рекомендован для
скрининговой/первичной диагностики ЗНО толстого кишечника.
Последняя версия (v.2.2011 2010 года) руководства NCCN по скринингу
колоректального рака [7] не рекомендует ни один сывороточный онкомаркер для
скрининговой/первичной диагностики ЗНО толстого кишечника.
4). ЗНО женской половой сферы.
4).1. ЗНО шейки матки.
NCI и ASCO не дают никаких рекомендаций по использованию сывороточных онкомаркеров для
диагностики ЗНО шейки матки.
В последней версии (v.1.2011 2010 года) практического руководства NCCN по
скринингу рака шейки матки [8] не рекомендуется ни один сывороточный онкомаркер для
скрининговой/первичной диагностики данного заболевания.
4).2. ЗНО тела матки.
NCI, ASCO и NCCN
не дают никаких рекомендаций по использованию сывороточных онкомаркеров для
диагностики ЗНО тела матки.
4).3. ЗНО яичников.
ASCO и NCCN не дают никаких рекомендаций по использованию
сывороточных онкомаркеров для диагностики ЗНО яичников.
Сайт NCI отмечает возможность
использования онкомаркера CA125, ссылаясь на данные двух исследований типа
"случай-контроль": чувствительность колеблется от 20% до 57% (при пороговом
значении 35 Ед/мл) для случаев рака яичника, развившихся в течение последующих 3
лет наблюдений, при специфичности 95% [9],
[10].
В данном случае, специфичность теста на сывороточный СА125
достаточно высока (сравнима с таковой для СА/ВЭЖХ), но существенно более низкая
специфичность обеспечивает худшую, по сравнению с СА/ВЭЖХ, диагностическую
точность.
5). ЗНО мочевого пузыря.
NCI, ASCO и NCCN не дают никаких рекомендаций по использованию
сывороточных онкомаркеров для диагностики ЗНО мочевого пузыря.
6). ЗНО молочной железы.
Ни сайт NCI, ни последняя версия руководства NCCN (v.1.2010) по скринингу и диагностике рака
молочной железы [11] не рекомендует сывороточные онкомаркеры для
скрининговой/первичной диагностики рака молочной железы.
Последняя на текущий момент версия рекомендаций ASCO (2007г) по
использованию опухолевых маркеров при раке молочной железы
[12] не рекомендует ни
один сывороточный онкомаркер для скрининговой/первичной диагностики рака молочной железы.
7). ЗНО лимфоидной ткани.
NCI, ASCO и NCCN не дают никаких рекомендаций по использованию
сывороточных онкомаркеров для диагностики ЗНО лимфоидной ткани.
8). ЗНО простаты.
Сайт NCI и последняя версия (v.2.2010) руководства NCCN по раннему выявлению рака
простаты [15] рассматривают
различные варианты теста на сывороточный простато-специфический антиген (PSA,
ПСА) для скрининга/первичной диагностики рака простаты. Эти варианты рассмотрены
ниже. ASCO не выпускало рекомендаций/руководств по использованию
сывороточных онкомаркеров для диагностики ЗНО простаты.
8).1. Общий сывороточный ПСА.
Сывороточный ПСА существует как в свободной форме, так и
в связи с рядом ингибиторов протеаз. В пробах на общий ПСА измеряется как
свободный, так и связанный ПСА. На сайте NCI дается ссылка на отчет Thompson
I.M. с соавт. [13] о масштабном
клиническом рандомизированном исследовании по предотвращению рака простаты (Prostate
Cancer Prevention Trial), проводившемся в США с 1993 по 2003 г на 18882
мужчинах, которые на момент начала испытаний были здоровы, имели уровень
сывороточного общего ПСА ≤ 3 нг/мл и нормальные
результаты пальцевого ректального исследования. В ходе испытаний у 1225
наблюдаемых развился рак простаты. Пороговые значения общего ПСА в сыворотке
1.1, 2.1, 3.1, и 4.1 нг/мл обеспечили чувствительность выявления рака простаты
83.4%, 52.6%, 32.2%, и 20.5% при специфичности 38.9%, 72.5%, 86.7% и 93.8%,
соответственно.
Как видно из вышеприведенных данных по общему сывороточному ПСА,
при любой изученной пороговой величине концентрации данный тест обеспечивал
значительно худшую диагностическую точность, чем СА/ВЭЖХ сыворотки крови.
8).2. Свободный и связанный сывороточный ПСА.
В ряде исследований проводилась
оценка чувствительности и специфичности свободного и связанного сывороточного
ПСА в диагностике рака простаты в сравнении с общим ПСА. Например, в работе
Brawer M.K. с соавт. [14] для
таких показателей, как общий ПСА, свободный/общий ПСА и связанный ПСА, были
выбраны пороговые значения, обеспечивающие 95% чувствительность; при этом
специфичность данных тестов составила 21.8%, 15.6% и 26.7%, соответственно.
В данном случае, высокая чувствительность сочетается с крайне
низкой специфичностью тестов, что обеспечивает худшую диагностическую точность,
чем у СА/ВЭЖХ-теста.
8).3. Скорость изменения концентрации сывороточного
ПСА.
Под скоростью изменения
концентрации сывороточного ПСА понимается величина, на которую
изменилась концентрация ПСА у данного пациента за промежуток времени
между двумя обследованиями. В работе Brawer M.K. с соавт.
[16], на которую ссылается
сайт NCI, сообщается, что положительное прогностическое значение такого
показателя, как 20% годовой прирост концентрации общего сывороточного
ПСА у лиц с начальной концентрацией менее 4 нг/мл, составило 17.1%.
8).4. Плотность ПСА.
Поскольку известно, что больший
размер простаты, увеличенной вследствие гиперплазии переходной зоны,
ассоциируется с большей концентрацией сывороточного ПСА, был
предложен такой диагностический индекс как плотность ПСА, т.е.
отношение концентрации сывороточного ПСА к объему простаты. Сайт
NCI утверждает: "Ранние работы, например
исследование Benson M.C. с соавт.
[17], свидетельствовали, что данный
показатель может дифференцировать рак простаты от доброкачественной
патологии простаты. Однако последующие оценки этого теста не
подтвердили наличия сколь-либо клинически ценных ассоциаций
[18],[19]
."
8).5. Плотность ПСА по переходной зоне.
Это отношение концентрации
сывороточного ПСА к объему переходной зоны простаты. На сайте NCI
даются ссылки на 2 работы [20],[21],
утверждающие полезность этого теста для диагностики рака простаты.
Поскольку в тезисах данных работ используются показатели, не дающие
представления о точных значениях чувствительности и специфичности
теста (площадь под кривой операционной характеристики (КОХ) без
изображения КОХ, процент снижения количества ненужных биопсий), мы
приведем данные из свежей работы Emerson P. Gregorio с соавт.
[22], бесплатно
доступной в интернете. Лучшие значения чувствительности и
специфичности, которые были получены в упомянутой работе для
диагностики рака простаты по общему сывороточному ПСА (порог 6.791
нг/мл), плотности ПСА по переходной зоне (порог 0.2107 нг/мл/см3),
плотности ПСА (порог 0.1157 нг/мл/см3) и % свободного ПСА (порог
11.3%) составили, соответственно: чувствительность 60.5%, 67.6%,
68.4%, 55.6% при специфичности 70.1%, 77.8%, 78.8% и 93.1%.
Как видно, любая из приведенных выше пар показателей
"чувствительность-специфичность" обеспечивает существенно худшую
диагностическую точность в диагностике рака простаты, чем
СА/ВЭЖХ-тест.
8).6.
Возрастные нормы сывороточного ПСА.
Во многих исследованиях
было отмечено, что уровни сывороточного ПСА возрастают у здоровых мужчин
с возрастом. С учетом этой тенденции, рядом авторов было предложено
ввести возрастные нормы сывороточного ПСА. В работе J.E. Oesterling с
соавт. [23] предложены
следующие возрастные пороговые значения общего сывороточного ПСА для
белых мужчин США в возрасте 40-79 лет, основанные на 95-процентильном
перекрытии: 40-49 лет - 2.5 нг/мл, 50-59 лет - 3.5 нг/мл, 60-69 лет -
4.5 нг/мл, 70-79 лет - 6.5 нг/мл. В таблице 1
[24] представлены показатели
чувствительности и специфичности диагностики рака простаты для теста на
общий сывороточный ПСА при использовании разных пороговых величин
последнего в разных возрастных группах белых мужчин США.
Таблица 1. Чувствительность и специфичность диагностики
рака простаты для теста на общий сывороточный ПСА в разных возрастных
группах белых мужчин США.
|
общий сывороточный ПСА, нг/мл |
40-49 лет |
50-59 лет |
60-69 лет |
70-79 лет |
|
Ч
% |
С
% |
Ч
% |
С
% |
Ч
% |
С
% |
Ч
% |
С
% |
|
1.0 |
99.3 |
76.0 |
99.7 |
52.8 |
99.7 |
36.1 |
99.2 |
31.3 |
|
2.0 |
98.4 |
94.6 |
99.4 |
83.4 |
98.4 |
66.0 |
98.0 |
55.4 |
|
3.0 |
84.7 |
100.0 |
97.8 |
93.2 |
96.5 |
81.2 |
97.4 |
70.0 |
|
4.0 |
62.0 |
100.0 |
74.8 |
97.4 |
91.1 |
93.0 |
92.1 |
81.2 |
|
5.0 |
38.7 |
100.0 |
46.6 |
98.7 |
71.0 |
97.1 |
90.0 |
90.8 |
|
6.0 |
25.4 |
100.0 |
26.1 |
99.1 |
52.2 |
98.8 |
88.7 |
96.3 |
|
7.0 |
20.7 |
100.0 |
11.8 |
99.1 |
28.0 |
100.0 |
65.2 |
98.8 |
|
8.0 |
16.4 |
100.0 |
9.3 |
100.0 |
11.3 |
100.0 |
46.5 |
99.8 |
|
9.0 |
12.5 |
100.0 |
7.8 |
100.0 |
6.7 |
100.0 |
31.2 |
99-9 |
|
10.0 |
10.8 |
100.0 |
7.5 |
100.0 |
3.1 |
100.0 |
22.8 |
100.0 |
|
11.0 |
9.3 |
100.0 |
5.3 |
100.0 |
2.5 |
100.0 |
15.9 |
100.0 |
|
12.0 |
8.4 |
100.0 |
4.3 |
100.0 |
1.3 |
100.0 |
11.5 |
100.0 |
|
13.0 |
7.3 |
100.0 |
4.0 |
100.0 |
1.1 |
100.0 |
7.7 |
100.0 |
|
14.0 |
6.3 |
100.0 |
3.1 |
100.0 |
0.8 |
100.0 |
7.2 |
100.0 |
|
15.0 |
5.2 |
100.0 |
2.5 |
100.0 |
0.5 |
100.0 |
6.6 |
100.0 |
|
Ч –
чувствительность, С - специфичность |
Как явствует из данной таблицы, при некоторых
пороговых значениях общего сывороточного ПСА практически в каждой
возрастной группе пациентов можно найти пару
"чувствительность-специфичность", которая обеспечивает
диагностическую точность в диагностике рака простаты не хуже (а
иногда, лучше), чем СА/ВЭЖХ-тест.
9). ЗНО почек.
NCI, ASCO и NCCN не дают никаких рекомендаций по использованию
сывороточных онкомаркеров для диагностики ЗНО почек.
Резюме по п.6.3.: таким образом, из
рассмотренных в отношении диагностики ЗНО сывороточных онкомаркеров (для тех
органов, которые могут быть обследованы СА/ВЭЖХ-тестом), единственной достойной
по диагностической точности альтернативной СА/ВЭЖХ-тесту является
возрастно-соотнесенный общий
сывороточный ПСА - в диагностике рака простаты.
7.
Стоимость анализа.
Стоимость обследования можно узнать по телефону +7-831-2584684.
Пн-Птн, 9.00-17.00
8. Как направить пациента на СА/ВЭЖХ?
Для направления пациента на обследование методом СА позвоните нам по
телефону в Н.Новгороде (831)2584684.
9. Консультанты.
С ООО "Медицинская диагностика" сотрудничают ведущие клинические специалисты
г.Н.Новгорода, доктора и кандидаты медицинских наук, которые хорошо знакомы
с применением методов СА/ВЭЖХ-диагностики на практике. Наши консультанты всегда
готовы поделиться с вами, уважаемые коллеги, своим клиническим опытом по
использованию метода СА/ВЭЖХ-диагностики, а также, в случае необходимости,
проконсультировать ваших пациентов, прошедших обследование нашим методом.
Список консультантов см. здесь.
10.
Правообладание.
Авторские права на метод защищены патентами
РФ.
11. Разрешение на
применение методов СА и ВЭЖХ.
Разрешения Федеральной службы по надзору в
сфере здравоохранения и социального развития на применение новой медицинской
технологии ФС №2008/245, №2008/246
от 18.11.2008.
Литература
[1] Патент РФ "Способ
дифференциальной диагностики злокачественных новообразований и соматических
незлокачественных заболеваний."
№ 2232391 от
10.07.2004.
[2]
Панченков А.Н. Энтропия. Нижний Новгород:
Интелсервис. 1999. 592с.
[3]
Панченков А.Н. Энтропия-2. Нижний Новгород:
Интелсервис. 2002. 713с.
[4] Патент "Способ дифференциальной диагностики
злокачественных новообразований и соматических незлокачественных
заболеваний."
№
2335768 от
10.10.2008.
[5] Kitahara F,
Kobayashi K, Sato T, et al.: Accuracy of screening for gastric cancer using
serum pepsinogen concen-trations. Gut 44 (5): 693-7, 1999.
[6] Gershon Y. Locker,
Stanley Hamilton, Jules Harris, et al. ASCO 2006 Update of Recommendations
for the Use of Tumor Markers in Gastrointestinal Cancer. J Clin Oncol
24:5313-5327, 2006.
[7] Colorectal Cancer
Screening.v.2.2011 2010. http://www.nccn.org
[8] Cervical Cancer
Screening. V.1.2011 2010. http://www.nccn.org
[9] Zurawski VR Jr,
Orjaseter H, Andersen A, et al.: Elevated serum CA 125 levels prior to
diagnosis of ovarian neo-plasia: relevance for early detection of ovarian
cancer. Int J Cancer 42 (5): 677-80, 1988.
[10] Helzlsouer KJ,
Bush TL, Alberg AJ, et al.: Prospective study of serum CA-125 levels as
markers of ovarian cancer. JAMA 269 (9): 1123-6, 1993.
[11] Breast Cancer
Screening and Diagnosis Guidelines. v.1.2010
http://www.nccn.org
[12] Harris L, Fritsche H, Mennel R, Norton L,
Ravdin P, Taube S, Somerfield MR, Hayes DF, Bast RC Jr; American Society of
Clinical Oncology. American Society of Clinical Oncology 2007 update of
recommendations for the use of tumor markers in breast cancer. J Clin Oncol.
2007 Nov 20;25(33):5287-312. Epub 2007 Oct 22. Review.
[13] Thompson IM,
Ankerst DP, Chi C, et al.: Operating characteristics of prostate-specific
antigen in men with an initial PSA level of 3.0 ng/ml or lower. JAMA 294
(1): 66-70, 2005.
[14] Brawer MK, Meyer
GE, Letran JL, et al.: Measurement of complexed PSA improves specificity for
early detection of prostate cancer. Urology 52 (3): 372-8, 1998.
[15] Prostate Cancer
Early Detection. v.2.2010
http://www.nccn.org
[16] Brawer MK, Beatie
J, Wener MH, et al.: Screening for prostatic carcinoma with prostate
specific antigen: results of the second year. J Urol 150 (1): 106-9, 1993.
[17] Benson MC, Whang
IS, Pantuck A, et al.: Prostate specific antigen density: a means of
distinguishing benign prostatic hypertrophy and prostate cancer. J Urol 147
(3 Pt 2): 815-6, 1992.
[18] Bangma CH, Grobbee
DE, Schr?der FH: Volume adjustment for intermediate prostate-specific
antigen values in a screening population. Eur J Cancer 31A (1): 12-4, 1995.
[19] Babaian RJ, Kojima
M, Ramirez EI, et al.: Comparative analysis of prostate specific antigen and
its indexes in the detection of prostate cancer. J Urol 156 (2 Pt 1): 432-7,
1996.
[20] Djavan B, Remzi M,
Zlotta AR, et al.: Combination and multivariate analysis of PSA-based
parameters for prostate cancer prediction. Tech Urol 5 (2): 71-6, 1999.
[21] Horninger W,
Reissigl A, Klocker H, et al.: Improvement of specificity in PSA-based
screening by using PSA-transition zone density and percent free PSA in
addition to total PSA levels. Prostate 37 (3): 133-7; discussion 138-9,
1998.
[22] Gregorio EP,
Grando JP, Saqueti EE, Almeida SH, Moreira HA, Rodrigues MA.: Comparison
between PSA density, free PSA percentage and PSA density in the transition
zone in the detection of prostate cancer in patients with serum PSA between
4 and 10 ng/mL. Int Braz J Urol. 2007 Mar-Apr;33(2):151-60.
[23] Oesterling JE,
Jacobsen SJ, Chute CG, et al. Serum prostate-specific antigen in a
community-based population of healthy men: establishment of age-specific
reference ranges. JAMA 1993;270:860-864.
[24] Morgan TO,
Jacobsen SJ, McCarthy WF, Jacobson DJ, McLeod DG, Moul JW. Age-specific
reference ranges for prostate-specific antigen in black men. N Engl J Med.
1996 Aug 1;335(5):304-10.
